高糖dmem培養(yǎng)基是一種廣普培養(yǎng)基,它是一種改進(jìn)的Eagle培養(yǎng)基,添加了更高濃度的氨基酸、維生素和其他營養(yǎng)素。它廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)的各個(gè)領(lǐng)域,可用于培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞系、原代細(xì)胞、干細(xì)胞等。DMEM培養(yǎng)基有高糖型(4.5g/L)、低糖型(1g/L)和無糖型。
該產(chǎn)品營養(yǎng)豐富,包括四倍濃度的氨基酸和維生素,以及甘氨酸、絲氨酸和硝酸亞鐵。原配方主要用于小鼠胚胎細(xì)胞的培養(yǎng)。目前,它被用于多種動(dòng)物細(xì)胞的生長。
高糖dmem培養(yǎng)基應(yīng)用選擇方法是什么呢?
?。?)用于建立細(xì)胞系的培養(yǎng)基應(yīng)為培養(yǎng)此類細(xì)胞的培養(yǎng)基。購買細(xì)胞系時(shí),您可以參考參考資料或參考。
(2)嘗試其他實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)基。許多培養(yǎng)基可適用于多種細(xì)胞。
?。?)根據(jù)細(xì)胞株的特性和實(shí)驗(yàn)的需要選擇培養(yǎng)基。
?。?)用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)靶細(xì)胞并觀察其生長狀態(tài)是一種客觀的方法,可以通過生長曲線、集落形成率等指標(biāo)來判斷,并根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇合適的培養(yǎng)基。
高糖dmem培養(yǎng)基的配制方法如下:
1、準(zhǔn)備新鮮的三重蒸餾水或超純水。
2、稱取所需量的干粉培養(yǎng)基,加入約一半終體積的三蒸餾水;如果制備了包裝培養(yǎng)液,在將整個(gè)包裝好的干粉倒入三個(gè)蒸汽水中后,用水沖洗包裝袋內(nèi)表面兩次,并將其倒入培養(yǎng)液中,以確保所有干粉溶解在培養(yǎng)液中。磁攪拌或手動(dòng)攪拌使其*溶解。
3、根據(jù)包裝袋上的要求添加所需量的碳酸氫鈉;根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要添加HEPES(5-20mmol/L)、谷氨酰胺等特殊物質(zhì)。
4、加水至終體積。
5、如有必要,用1mol/L、鹽酸1mol/L和*調(diào)節(jié)pH值。
6、用無菌0.22um濾膜過濾消毒,分裝于無菌血清瓶中,4℃冰箱保存。使用前在制備的培養(yǎng)基中加入100u/ml青霉素和100u/ml鏈霉素,根據(jù)需要加入血清(5%-20%)。